COA-Cl【2-Cl-C.OXT-A】

COA-Cl【2-Cl-C.OXT-A】

類VEGF/NGF活性小分子化合物

COA-Cl（2-Cl-C.OXT-A）是具有促進(jìn)血管生成作用的小分子化合物。此外，它還具有神經(jīng)保護(hù)和營(yíng)養(yǎng)作用。COA-Cl為水溶性，有望代替VEGF和NGF在再生醫(yī)療中用于促進(jìn)血管和神經(jīng)的生成。另外，它還可作為Xeno-free培養(yǎng)基的添加劑進(jìn)行使用。

參與血管生成相關(guān)的因子包括VEGF（血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子）、PDGF（血小板衍生生長(zhǎng)因子）、HGF（肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子）、FGF（纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子）和血管生成素等，但這些因子都是大分子肽，并且暫未具類似效果的穩(wěn)定的小分子肽。

由于血管生成是癌癥生成和轉(zhuǎn)移所不可少的，所以作為抗癌劑的血管生成抑制劑的研發(fā)備受關(guān)注。此外，針對(duì)糖尿病和動(dòng)脈硬化引起的血管阻塞等導(dǎo)致的血流不足，血管生成促進(jìn)劑的研發(fā)也備受期待。

經(jīng)驗(yàn)證，COA-Cl在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）的培養(yǎng)細(xì)胞中具有促進(jìn)管腔形成的作用。另外，其在雞絨毛尿囊膜和兔角膜的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中的也證實(shí)具有促進(jìn)血管生成的作用。

◆特點(diǎn)

●　具有促進(jìn)血管生成作用。

●　可促進(jìn)HUVEC（人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞）的血管生成。可促進(jìn)CAM（雞胚絨毛尿囊膜)實(shí)驗(yàn)中CAM的生成以及兔角膜血管生成。

●　由于不會(huì)激活HUVEC細(xì)胞中的VEGFR-2、所以可以促進(jìn)MEK(MAPKK)和ERK1/2(MAPK)的活化（磷酸化）。

◆用途

●　制備血管模型

●　制備疾病模型

●　分析藥劑作用機(jī)制

●　激活細(xì)胞

……

◆應(yīng)用實(shí)例

儲(chǔ)備液制備：使用生理鹽水溶解至2 mM

使用濃度： 用于HUVEC細(xì)胞時(shí)，濃度為 10~500 μM

儲(chǔ)存條件：室溫（溶解后，冷藏保存）

◆產(chǎn)品概況

●　外觀：白色~微褐色，結(jié)晶性粉末~粉末或結(jié)塊

●　溶解性：可溶于水

◆數(shù)據(jù)

■ 在血管內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的共培養(yǎng)體系中使用的案例：促進(jìn)血管生成作用

培養(yǎng)10天后形成的血管管腔面積有所增加。

（數(shù)據(jù)提供：香川大學(xué)醫(yī)學(xué)部 塚本郁子老師）

■ 使用雞絨毛尿囊膜 (CAM)和兔角膜驗(yàn)證促進(jìn)血管生成作用的案例

（數(shù)據(jù)提供：香川大學(xué)醫(yī)學(xué)部 塚本郁子老師）

■ 驗(yàn)證在正常人成纖維細(xì)胞中促進(jìn)VEGF產(chǎn)生和分泌的案例

更換為含±COA-Cl（100 mmol/L）的培養(yǎng)基，在常氧和缺氧（1%）下培養(yǎng)24 h后，使用ELISA試劑盒 對(duì)中細(xì)胞中、培養(yǎng)基中的VEGF進(jìn)行定量檢測(cè)。

結(jié)果顯示，在含有COA-Cl的培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)，可以觀察到VEGF的產(chǎn)生和分泌量更高。

（數(shù)據(jù)提供：香川大學(xué)醫(yī)學(xué)部 塚本郁子老師）

■ 神經(jīng)模型細(xì)胞（PC12）中的突出伸長(zhǎng)案列（培養(yǎng)96 h）：神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用

（數(shù)據(jù)提供：香川大學(xué)醫(yī)學(xué)部 塚本郁子老師）

■ 神經(jīng)模型細(xì)胞（PC12）中的多巴胺濃度上升

培養(yǎng)3天后，使用HPLC檢測(cè)培養(yǎng)基中的多巴胺濃度。

結(jié)果顯示，多巴胺的濃度上升。

（數(shù)據(jù)提供：香川大學(xué)醫(yī)學(xué)部 塚本郁子老師）

■ 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞（C6）的培養(yǎng)案例：細(xì)胞保護(hù)作用

（A）D-MEM （B）D-MEM＋血清（馬15%＋牛2.5%）（C）D-MEM＋COA-Cl（100 μmol/L）

接種大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞（C6）至24微孔板，第二天分別加入到（A）、（B）、（C）培養(yǎng)基，培養(yǎng)16天（無(wú)需更換培養(yǎng)基）第12天時(shí)，（A）和（B）中的細(xì)胞已死亡，但（C）中沒(méi)有任何變化，并且在第14天時(shí)將培養(yǎng)基更換為（B）后，細(xì)胞開(kāi)始增殖。

（數(shù)據(jù)提供：香川大學(xué)醫(yī)學(xué)部 塚本郁子老師）

■ 神經(jīng)模型細(xì)胞（PC12）的培養(yǎng)案例：作為血清替代物使用的可能性

接種神經(jīng)模型細(xì)胞（PC12），次日更換D-MEM±血清（馬10%+牛5%），添加COA-Cl（100 μmol/L），24 h后計(jì)算細(xì)胞數(shù)。

結(jié)果顯示，添加COA-Cl時(shí)，細(xì)胞數(shù)增加。此外，在不含血清的培養(yǎng)基中，添加了COA-Cl的培養(yǎng)基與添加了血清的培養(yǎng)基有著相同程度的細(xì)胞增殖。

（數(shù)據(jù)提供：香川大學(xué)醫(yī)學(xué)部 塚本郁子老師）

■ 神經(jīng)模型細(xì)胞（PC12）中的培養(yǎng)案例：對(duì)氧化應(yīng)激的保護(hù)作用

接種神經(jīng)模型細(xì)胞（PC12），次日更換培養(yǎng)基，添加COA-CI（10 μmol/L）和過(guò)氧化氫（200 μmol/L）。24 h后檢測(cè)響應(yīng)應(yīng)激釋放的LDH、凋亡相關(guān)蛋白以及活性氧。

結(jié)果顯示，添加COA-CI時(shí)，LDH、凋亡相關(guān)蛋白以及活性氧的釋放量有所減少。

（數(shù)據(jù)提供：香川大學(xué)醫(yī)學(xué)部 塚本郁子老師）

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