抗P2RY12，豚鼠

抗P2RY12，豚鼠

Anti P2RY12, Guinea Pig

P2RY12（也稱為 P2Y12）是一種腺苷 5'-二磷酸 (ADP) 受體，也是嘌呤能 G 蛋白偶聯受體 P2Y 家族的成員。它在外周組織的血小板中表達，也在中樞神經系統的穩態小膠質細胞（Homeostatic Microglia)中特異性表達。由于P2RY12幾乎不在巨噬細胞中表達，所以它是用于區分存在腦血管周圍的巨噬細胞和小膠質細胞的有效標志物^1）。此外，ADP可用作細胞損傷的信號，小膠質細胞中的P2RY12被認為在接收神經細胞損傷方面發揮作用。

本產品為豚鼠來源多克隆抗體，可用于免疫組織染色的多重染色。

外觀：液體

濃度：蛋白濃度 0.45～0.65 mg/mL

◆抗體信息

※ 大鼠的染色實例請查看下方“數據"部分。

◆Protocol（示例）

  1.  灌注固定：使用檸檬酸鈉/PBS灌注除血后，4% PFA灌注

  2.  后固定： 4% PFA (～24 h)

  3.  蔗糖替換：30%蔗糖/PBS（4℃，過夜~約2天）

  4.  制備冰凍切片：去除蔗糖后，制備冰凍包埋塊，并用低溫恒溫器制備30 μm厚的切片

  5.  封閉：5% 正常山羊血清，0.3% Triton X-100/PBS（4℃，過夜）

  6.  一抗：抗 P2RY12，豚鼠（1︰1,000），1% 正常山羊血清，0.3% TritonX-100/PBS（4℃，過夜~2 天）

  7.  清洗：0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)

  8.  二抗：Alexa Fluor^® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L) (1:500) （產品編號： 568-77901), 1% 正常山羊血清，

                 0.3% TritonX-100/PBS (室溫，2 h)

  9.  清洗：0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)

10.  封裝：封片劑封裝，4℃下避光存儲

◆數據

性能數據

▼ 與抗Iba1抗體比較

使用抗P2RY12抗體和抗Iba1抗體對小鼠大腦（冰凍切片）進行免疫組織染色。

■ 使用抗體

P2RY12

一抗：抗 P2RY12，豚鼠（產品編號：011-28873，本產品）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor^® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（產品編號：568-77901）

Iba1

一抗：抗iba1，兔源（免疫細胞化學用）（產品編號：019-19741）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor^® 594-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (產品編號：566-80511)

【結果】

已確認P2RY12信號和Iba1信號的共定位。

▼ 鑒別小膠質細胞和巨噬細胞

使用抗P2RY12抗體（小膠質細胞標志物）、抗 Iba1抗體（小膠質細胞/巨噬細胞標志物）和抗層粘連蛋白抗體（腦血管基底膜標志物）對小鼠大腦皮層和延髓末端的冰凍切片進行三重染色，確認細胞定位。

■ 使用抗體

P2RY12

一抗：抗P2RY12，豚鼠（產品編號：011-28873，本產品）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor^® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L)產品編號：568-77901）

Iba1

一抗：抗iba1，兔源（免疫細胞化學用）（產品編號：019-19741）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor^® 594-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (產品編號：566-80511)

層粘連蛋白

一抗：抗層粘連蛋白抗體（大鼠，宮田老師實驗室制備）1︰200

二抗： DyLight™ 405 結合AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)（生產商編碼：112-475-003）

【結果】

Iba1陽性細胞中，腦實質內的細胞呈P2RY12陽性，可能是小膠質細胞（三角箭頭）。 而Iba1陽性/P2RY12陰性的細胞存在于腦血管基底膜周圍，這些細胞可能是巨噬細胞（箭頭）。

▼ 與抗Iba1抗體和抗TMEM119抗體比較

使用抗P2RY12抗體、抗Iba1抗體和抗TMEM119抗體對小鼠大腦和脊髓（冰凍切片）進行免疫組織染色。

■ 使用抗體

P2RY12

一抗：抗P2RY12，豚鼠（產品編號：011-28873，本產品）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor^® 647 AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（產品編號：566-78421）

Iba1

一抗：抗iba1，山羊源（產品編號：011-27991）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor 488 AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG (H+L) (產品編號：561-78351)

TMEM119

一抗：其他公司 抗TMEM119抗體 (兔源) 1︰100

二抗：Alexa Fluor^® 594-AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L) (產品編號： 561-78471)

【結果】

與抗TMEM119抗體相比，使用FUJIFILM Wako的抗P2RY12抗體染色能更清晰地檢測細微的突起結構。

▼與其他公司產品比較

使用本產品和其他公司的抗P2RY12抗體對小鼠大腦和脊髓（冰凍切片）進行免疫組織染色。

■ 使用抗體

本產品

一抗：抗 P2RY12，豚鼠（產品編號：011-28873，本產品）1︰1,000（抗體濃度：0.5 μg/mL）

二抗：Alexa Fluor^® 488 AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（產品編號：562-78401）

其他公司產品

一抗：其他公司 抗P2RY12（兔源）1︰200（抗體濃度：0.5 μg/mL）

二抗：Alexa Fluor^® 488 AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L) (產品編號：567-78451)

【結果】

傳統產品中可觀察到神經細胞的非特異性信號（三角箭頭），而本產品中幾乎檢測不到非特異性信號。

◆應用數據

▼ 免疫組織染色

小鼠

	物種：小鼠 部位：海馬體 樣品：冰凍切片 稀釋倍率：1︰500 <數據提供> 御茶水女子大學人類生命科學研究所 橋本老師		物種：小鼠 部位：海馬體 樣品：冰凍切片 稀釋倍率：1︰1,000 備注：活化處理        （檸檬酸鈉緩沖液） <數據提供> 御茶水女子大學人類生命科學研究所 橋本老師
	物種：小鼠 部位：正中隆起 樣品：冰凍切片 稀釋倍率：1︰1,000 <數據提供> 旭川醫科大學 解剖學講座 機能形態學領域 古部老師		物種：小鼠 部位：脊髓 樣品：冰凍切片 稀釋倍率：1︰2,000 <數據提供> 九州大學 大學院藥學研究院 藥理學領域 津田老師 河野老師

大鼠

以上實驗數據由研究人員友情提供，無法保證實驗結果。關于以上數據的相關問題我們也無法回答，敬請諒解。

◆用戶反饋

以下是研究人員提供的評估問卷結果。

評價（原文翻譯）

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